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R語言可視化之ggplot2——KEGG通路富集分析

之前分享了如何用ggplot2可視化GO分析的結(jié)果。既然做了GO,當然少不了KEGG了。

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同樣的,我們從 DAVID 獲取KEGG pathway的結(jié)果。

對于KEGG,我比較喜歡做氣泡圖,這樣用兩種形式的圖結(jié)合在一起,效果更豐富更好看一點。

GO KEGG畫圖

之前的步驟參考:

用David得到了數(shù)據(jù),接下來畫幾張美麗的圖。GO有三個部分,BP,CC, MF。一般我們使用BP。但是這里我們想把三個部分都展示在圖片當中。

單細胞之富集分析-3:GO和KEGG富集分析及繪圖

單細胞富集分析系列:

單細胞富集分析我最常用的是 分組GSVA ,但最近用到了GO分析,就復(fù)習一下GO和KEGG富集分析及繪圖。

載入無比熟悉的pbmc.3k數(shù)據(jù)集 (已注釋好,數(shù)據(jù)準備見 monocle )

pbmc3k數(shù)據(jù)集只有1個樣本,沒辦法區(qū)分HC和病例組。

若有分組,可以使用subset函數(shù)將某種細胞取出,來做這種細胞病例組和對照組相比的差異基因和富集分析

之所以長短不齊不按順序是因為沒有排序

排完續(xù)之后再畫p值就是按順序的了

附: 單細胞測序數(shù)據(jù)的差異表達分析方法總結(jié)

轉(zhuǎn)錄組不求人系列(十三): GO、KEGG富集個性化作圖

當富集分析完成,拿到如下的分析結(jié)果后,就可以進行作圖了。

富集分析結(jié)果的可視化無非就是柱狀圖和氣泡圖,但是公司默認出圖實在是太丑,所以還是自己動手修改修改。

一、常規(guī)柱狀圖(ggplot2)

橫軸為gene counts,或者用-logP也行,填充相應(yīng)的用P值或者gene counts。ggplot畫圖的好處就是可以進行很多調(diào)整。

二、常規(guī)氣泡圖(ggplot2)

氣泡圖與柱狀圖如出一轍,只是在展示方式上出現(xiàn)了差別。一個用geom_bar()函數(shù),氣泡圖類似于散點圖用geom_point()函數(shù)。

三、上下調(diào)同時展示(ggplot2)

很多時候研究者拿到差異基因后,上下調(diào)基因是分別富集的,在展示上需要同時體現(xiàn)二者,我們之前提到metascape可以做到: 轉(zhuǎn)錄組不求人系列(十二): Cell文章最喜歡用的差異基因GO、KEGG富集分析工具 ,除此之外,之前講過的氣泡圖也可以展現(xiàn)多組的結(jié)果: 復(fù)現(xiàn)《nature communications》圖表(四):ggplot畫多組富集氣泡圖 。這里我們繼續(xù)提供一種bar圖的展示方式。將down的數(shù)值調(diào)整為負,做一列分組,就可以展示了。

當然了,以上所說的可視化還是比較常規(guī),在基礎(chǔ)上可以自己做調(diào)整。也有一些文章總是標新立意,有很多奇特的展現(xiàn)方式,我們會在之后的系列中講解。

【R語言】解決GO富集分析繪圖,標簽重疊問題

前面我給大家詳細介紹過

?GO簡介及GO富集結(jié)果解讀

?四種GO富集柱形圖、氣泡圖解讀

?GO富集分析四種風格展示結(jié)果—柱形圖,氣泡圖

?KEGG富集分析—柱形圖,氣泡圖,通路圖

? DAVID GO和KEGG富集分析及結(jié)果可視化

也用視頻給大家介紹過

? GO和KEGG富集分析視頻講解

最近有粉絲反映說,利用clusterProfiler這個包繪制GO富集分析氣泡圖和柱形圖的時候,發(fā)現(xiàn)GO條目的名字都重疊在一起了。

氣泡圖

柱形圖

這個圖別說美觀了,簡直不忍直視。經(jīng)過我的認真研究,發(fā)現(xiàn)跟R版本有關(guān)。前面我給大家展示的基本都是R 3.6.3做出來的圖。很多粉絲可能用的都是最新版本的R 4.1.2。

我們知道R的版本在不停的更新,相應(yīng)的R包也在不停的更新。我把繪制氣泡圖和柱形圖相關(guān)的函數(shù)拿出來認真的研究了一下,終于發(fā)現(xiàn)的癥結(jié)所在。

dotplot這個函數(shù),多了個 label_format 參數(shù)

我們來看看這個參數(shù)究竟是干什么用的,看看參數(shù)說明

label_format :

a numeric value sets wrap length, alternatively a custom function to format axis labels. by default wraps names longer that 30 characters

原來這個參數(shù)默認值是30,當標簽的長度大于30個字符就會被折疊,用多行來展示。既然問題找到了,我們就來調(diào)節(jié)一下這個參數(shù),把他設(shè)置成100,讓我們的標簽可以一行展示。

是不是還是原來的配方,還是熟悉的味道

同樣的柱形圖,我們也能讓他恢復(fù)原來的容貌。

關(guān)于如何使用R做GO和KEGG富集分析,可參考下文

GO和KEGG富集分析視頻講解

R包 clusterProfiler: GO和KEGG富集結(jié)果顯示基因symbol

注:1)MF和CC方法同BP,將BP改為MF,CC即可。

2)可視化中,showCategory為顯示的item數(shù),scale_y_discrete則調(diào)節(jié)label過長的情況,讓圖片看起來

更美觀。

3)檢查結(jié)果,可見geneID展示為gene symbol。

(1)在enrichGO函數(shù)中,設(shè)置readable = TRUE;

(2)用setReadable函數(shù),對GO或者KEGG結(jié)果進行轉(zhuǎn)化即可。


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