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怎么使用IRESfinder分析環(huán)狀RNA的蛋白編碼潛能

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真核生物mRNA的5’ 帽子結構可以介導核糖體的結合,從而開啟翻譯過程,circRNA由于是一個閉合的環(huán)狀結構,缺失了5’端帽子結構,所以歸類為非編碼RNA的一種。

隨著環(huán)狀RNA研究的深入,有科學家發(fā)現(xiàn)部分環(huán)狀RNA可以編碼蛋白。除了常見的5’帽子結構介導核糖體結合外,還存在了一種特殊情況,在一些基因上存在一段長度在150-250bp的序列,這些序列能夠折疊成類似tRNA的結構,介導核糖體與RNA結合,起始蛋白質的翻譯。這樣的位點稱之為內部核糖體進入位點序列,Internal ribosome entry site, 簡稱IRES。

能夠編碼蛋白的環(huán)狀RNA上就是通過IRES來實現(xiàn)翻譯過程的,為例研究環(huán)狀RNA的蛋白編碼潛能,有學者開發(fā)了識別IRES的軟件,IRESfinder就是這樣一款軟件,用于識別真核生物的IRES位點。

利用實驗驗證過的583個人類的IRES序列,挑選了19個kmer用于區(qū)分IRES和非IRES的序列,在論文中,給出了測試數(shù)據(jù)集中二種序列的kmer分布

怎么使用IRESfinder分析環(huán)狀RNA的蛋白編碼潛能

在上圖中,只包含了18個kmer,另外還有一個kmer是T,可以看到在IRES和非IRES序列之間,這些kmer的頻率分布是有差異的。

軟件采用Python進行開發(fā),基本用法如下

python IRESfinder.py -f circRNA.fa -o IRES.out.xls

-f參數(shù)指定輸入的fasta格式的序列,-o參數(shù)指定輸出的結果文件。輸出文件的內容示意如下

ID Index Score
hsa_circ_0018046 IRES 0.817344005
hsa_circ_0039868 IRES 0.795083668
hsa_circ_0089160 IRES 0.53322605
hsa_circ_0048972 IRES 0.784080068
hsa_circ_0018658 IRES 0.745230164
hsa_circ_0067857 IRES 0.704497116
hsa_circ_0019137 IRES 0.742607966
hsa_circ_0063162 IRES 0.738372532
hsa_circ_0087609 IRES 0.793042932
hsa_circ_0006254 IRES 0.64587644

通過這個軟件,可以快速分析得到RNA上的IRES序列信息,不過軟件的結果中假陽性肯定是很高的,后續(xù)還要通過實驗手段來驗證。

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