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chip_seq在增強(qiáng)子研究中的應(yīng)用是怎樣的

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增強(qiáng)子是真核生物基因組中的一段長度在幾十到幾千bp之間的DNA序列,可以顯著提高靶標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄活性,屬于順式作用元件的一種。

1981年Benerji在SV40 DNA中發(fā)現(xiàn)一個(gè)140bp的序列,可以大大提高血紅蛋白融合基因的表達(dá)水平,位于SV40 早期基因的上游, 由兩個(gè)正向重復(fù)序列組成,每個(gè)長度在72bp 。

和啟動(dòng)子區(qū)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制相比,增強(qiáng)子的作用方式有以下幾個(gè)特點(diǎn)

  1. 具有遠(yuǎn)距離效應(yīng),增強(qiáng)子和靶標(biāo)基因的距離可以非常的遠(yuǎn),從幾K到幾M的距離都可以

  2. 無方向性,增強(qiáng)子可以對(duì)其兩側(cè)的靶標(biāo)基因進(jìn)行調(diào)控,而且靶基因可以在任意一條鏈上,而啟動(dòng)子只能下游臨近的基因

鑒定增強(qiáng)子的方法多種多樣,在chip_seq領(lǐng)域,常用的有以下幾種方式

  1. 對(duì)多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子的peak區(qū)域進(jìn)行聚類,識(shí)別增強(qiáng)子區(qū)域

  2. 將H3K4me1和K3K27ac這兩種組蛋白修飾作為增強(qiáng)子區(qū)的mark

  3. 使用II型RNA聚合酶的最大亞基POLR2A作為抗體進(jìn)行chip_seq,識(shí)別增強(qiáng)子

  4. 使用組蛋白乙酰化轉(zhuǎn)移酶P300作為抗體進(jìn)行chip_seq,識(shí)別增強(qiáng)子

通過對(duì)chip-seq數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,鑒定出了非常多的增強(qiáng)子序列。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步提出了超級(jí)增強(qiáng)子的概念,將增強(qiáng)子富集的區(qū)域定義為超級(jí)增強(qiáng)子,識(shí)別的方法如下

chip_seq在增強(qiáng)子研究中的應(yīng)用是怎樣的

首先利用chip數(shù)據(jù)識(shí)別到增強(qiáng)子區(qū)域,然后對(duì)增強(qiáng)子區(qū)進(jìn)行合并, 距離在12.5kb范圍內(nèi)的增強(qiáng)子合并為一個(gè)區(qū)域,最后將合并后的區(qū)域和未合并的區(qū)域根據(jù)某種score進(jìn)行排序,畫出第三步的圖,將斜率在1以上的區(qū)域稱之為超級(jí)增強(qiáng)子。

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文章起源:http://weahome.cn/article/jpiche.html

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